1.测定全血或红细胞转酮醇酶活性是诊断维生素B1缺乏较为可靠的指标。若给予硫胺二磷酸盐后该酶活性增加15%，则提示体内维生素B1缺乏。2.血丙酮酸和乳酸浓度维生素B1缺乏病人血丙酮酸含量（正常

1.测定全血或红细胞转酮醇酶活性是诊断维生素B1缺乏较为可靠的指标。若给予硫胺二磷酸盐后该酶活性增加15%，则提示体内维生素B1缺乏。2.血丙酮酸和乳酸浓度维生素B1缺乏病人血丙酮酸含量（正常值57～125μmol/L）和乳酸浓度升高。3.心电图检查病人心电图可正常也可异常，表现为窦性心动过速，QRS波低电压，T波倒置，电轴右偏。晚期Q-T间期延长。4.胸部X线检查常可见心脏扩大，肺淤血和胸腔积液。5.心导管检查常表现为右心房压升高，肺嵌顿压升高，心排血量增加，左心室射血分数在疾病早期正常，至疾病晚期下降。周围血管阻力下降，循环时间缩短，动静脉氧差减小。

可根据营养缺乏史及临床表现作出诊断，必要时可结合实验室检查或诊断性治疗。
1﹒暴发型脚气病性心脏病的诊断依据
（1）有3个月以上的维生素B1营养缺乏史及周围神经炎的征象；
（2）急骤发生的高输出量型心力衰竭，伴有烦渴；
（3）心脏增大，节律规则，无其他病因可查；
（4）对于可疑病例应立即作治疗试验，本病在治疗后症状迅即改善。
2﹒周围神经炎的诊断可用下法测定：
（1）蹲踞试验，病人取蹲踞姿势时。即觉小腿疼痛、起立困难，常用两手支持膝部帮助起立；
（2）腓肠肌挤压时有疼痛；
（3）足背、踝、小腿下部触觉及痛觉减退；
（4）踝、膝反射异常，大都减退或消失。
3﹒实验诊断方面主要为：
（1）血浆维生素B1含量降低，丙酮酸含量明显升高。
（2）尿维生素B1及其代谢产物排泄量的降低。
（3）维生素B1负荷试验：清晨排空膀胱，禁食，然后给维生素B15mg口服或1mg肌注，喝开水200ml，留4h尿测定维生素B1含量，正常人应排出100μg以上，维生素B1缺乏患者常低于50μg甚至为零。
（4）尿甲基乙二醛（methylglyoxal）测定。
4﹒脚气病性心脏病须与甲亢心、贫血心脏病、各种原因引起的心肌炎伴心衰鉴别。有浮肿者需与肾炎、营养不良和生理性浮肿鉴别。神经病变时须与铅、砷和某些药物中毒或麻风、菌痢、白喉等引起的神经病变相鉴别。应注意酗酒者，维生素B1缺乏症可与肝病、酒精中毒并存。