1.实验室检查网状细胞计数偏高，白细胞计数偏低呈核左移，血小板减少，肝功试验异常，血沉快，蛋白尿及血尿阳性。2.血液涂片镜检在红细胞内发现有多个环形体，而无色素颗粒，在溶血性贫血患者的末梢血液涂片中，可有极少数的红细胞含有原虫。3.接种试验将患者血液1.0ml接种于金黄地鼠腹腔，在12～14天内可产生原虫寄生血症，1个月后采尾血，可见病原虫。4.血清学诊断可用间接荧光抗体试验，间接血凝，毛细管凝集试验或酶联免疫吸附实验（ELISA法），聚合酶链反应（PCR）试验可在数小时内快速判定脱氧核糖核酸（DNA）。
根据发热、血红蛋白尿、黄疸、贫血等较为特征性的临床症状，以及病人是否去过疫区、有无蜱叮咬史、动物中是否存在巴贝虫病、病原学检查等综合情况进行诊断。
